卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算

来源：好试管作者：好试管更新时间：2023-10-24 点击数：

本文适合：

卵巢储备功能减退（diminished ovarian reserve，DOR）选择第三代辅助生殖技术，如

胚胎植入前基因检查 Preimplantation genetic testing,包括

PGT-APGT-M

卵巢早衰人群中，有一种情况并不算严重的类型

既被诊断为卵巢储备功能减退患者（diminished ovarian reserve，DOR）

依然有通过辅助生殖来实现妊娠的机会和概率

「关于诊断请参考」

生殖生物学贺医生：【深度剖析卵巢早衰】：诊治指南摘要与延展8 赞同 · 0 评论文章

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图1)

但由于导致卵巢早衰或卵巢反应性降低的因素很多

所以卵巢早衰的个体差异可能较为普遍

基于此，对于卵巢低反应人群，临床医生应该非常仔细和谨慎，以防止不必要的配子或胚胎丢失

目前有许多指导个体化促排用药的预测指数「关于预测，可参考下文」

生殖生物学贺医生：选择试管婴儿的卵巢早衰姐妹注意：你的促排方案可能不适合你「工具文」1 赞同 · 0 评论文章卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图2)

也确实有一些计算器能够预测辅助生殖成功率「可参我的这篇文章」

生殖生物学贺医生：试管婴儿成率这么算「上」1 赞同 · 0 评论文章

但并没有一款计算器诊断卵巢反应差且希望通过胚胎植入前基因检查来淘汰非整倍体胚胎的计算器

既：

没有一款计算器是帮助卵巢早衰患者，算一下，如果要得到一个可移植胚胎「整倍体胚胎」，到底需要做几个周期才可能实现

不过，今天介绍的辅助生殖计算器：POSEIDON标准的计算器，似乎可以实现

这款计算器可用于

基于POSEIDON标准而被诊断为卵巢低反应的人群「请回顾下文」

生殖生物学贺医生：波塞冬标准：卵巢功能低试管必看1 赞同 · 2 评论文章

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图3)

可以预测

基于夫妻双方的健康情况【如卵巢反应性、精子质量、取精方式等等】要获取至少一个整倍体胚胎「可移植的胚胎」到底需要取几个卵母细胞「大概需要做几个周期」

POSEIDON计算器网址「提醒：目前不免费」

计算器参照的夫妻选择的哪些治疗

研究从2016年2月至2017年6月在巴西坎皮纳斯参加ANDROFERT生育中心的连续不育夫妇。样本为，接受体外受精/胞浆内精子注（IVF-ICSI）治疗并打算进行滋养层活检以进行非整倍性植入前基因测试的不育夫妇。使用PGT-A的原因是孕妇高龄，严重的男性因素不育，反复流产，反复植入失败以及关注胚胎整倍体状态的患者。仅包括具有完整IVF / ICSI记录的患者。纳入的患者至少回收了一个成熟的卵母细胞。将成熟的（中期II [MII]）卵母细胞进行授精以供自用，并对所有产生的可行胚泡进行活检。进行了PGT平衡易位或单基因疾病极地活检的女性，以及在第3天胚胎进行PGT的女性被排除在外。排除涉及卵母细胞捐赠治疗的患者排除了在冻融胚胎PGT-A的患者，以及那些周期涉及使用不同来源的精子（例如，射精和手术回收的精子）或同时使用新鲜和冻融的配子（例如，新鲜的和冻融精子、冻融或新鲜和冻融的卵母细胞）进行授精的患者计算器考虑的变量因素有哪些？男女年龄体重指数（BMI）不孕持续时间不育因素是否患有无精症及类型窦卵泡计数（AFC）抗苗勒管激素（AMH）水平卵巢储备功能不佳的存在（POR）精液参数这些样本采取的哪种治疗方案及特点包括卵巢刺激方案的类型促性腺激素方案促性腺激素总剂量ICSI的精子来源以及ICSI的配子状态治疗结局包括回收的卵母细胞数量，回收的成熟（MII）卵母细胞数量，两个核（2PN）合子的数量，双核受精囊胚的数量和整倍体囊胚的数量

不育因素和卵巢储备的评估

所有纳入的夫妇均由生殖内分泌专家和男科专家进行了评估。通过在早期卵泡期进行的卵泡计数（AFC）使用改良的贝克曼库尔特AMH第二代测定的AMH水平确定卵巢储备。根据波塞冬标准将POR定义为AFC <5和/或AMH <1.2 ng / ml。对男性伴侣进行了彻底的评估，包括病史，体格检查，精液分析，激素谱（血清FSH，LH和总睾丸激素）以及基因检测（Yq微缺失和核型分析）。精液分析是根据《 2010年世界卫生组织人体精液检查手册》在该机构的男科学实验室进行的。使用精子染色质分散法（SCD；HalospermⓍR；西班牙）对所有男性的新鲜精液中的精子DNA片段化（SDF）进行评估，除非精子数量太少而无法准确测定。 DNA碎片化水平无精子症的类型由临床和实验室数据共同确定，并通过精子取出过程中睾丸活检标本的组织学评估得到证实。卵巢刺激方案「使用了哪些促排方案」常规拮抗剂和微刺激方案均用拮抗剂方案涉及重组FSH单药的皮下（SC）给药(rec-FSH; Gonal-FⓍR , Merck)或rec-FSH结合重组LH(2:1 ratio rec-FSH and rec-LH; PergoverisⓍR , Merck). 通过超声扫描确认没有卵巢囊肿后，在周期的第2天或第3天开始给予促性腺激素，当前卵泡的平均直径达到12–14 mm时（包括触发日），可通过每天皮下注射0.25 mg醋酸西曲瑞克 cetrorelix（CetrotideⓍR，Merck）来启动灵活的GnRH拮抗剂治疗方案。微刺激方案包括在周期早期使用柠檬酸克罗米芬或来曲唑来曲唑，然后使用低剂量的可注射重组促性腺激素。 OS方案和促性腺激素剂量的选择是基于临床医生对卵巢储备，女年龄和以前对OS的反应史的评估。仅对选定的POR患者使用卵巢微刺激「克罗米芬」。扳机日及卵母细胞回收「取卵」

最终卵母细胞的成熟是通过皮下给药曲普瑞林0.2 mg(DecapeptylⓍR , Ferring)或重组hCG（OvidrelⓍR，Merck）来实现的。通常，触发的标准包括两个直径为17 mm或更大的卵泡的存在。触发后35–36小时，在经阴道超声引导和丙泊酚静脉镇静的情况下进行卵母细胞取回。

受精实验室流程

暴露于透明质酸酶后剥离卵丘-卵母细胞复合物，根据核成熟度分类，并在37℃和5.5％CO2下培养直至显微注射精子。注入精子的卵母细胞在5.5％的CO2和5％的O2下于37°C培养液中孵育16-18 小时，受精后16-18 h，发现2PN和两个极体确认受精。将合子保持在培养中以达到胚泡期，并根据Gardner描述的标准对胚胎质量进行评分。卵母细胞的回收，精子处理和ICSI在洁净室环境中进行。

滋养层活检和植入前基因检测PGT-A使用滋养外胚层细胞进行经过下一代测序（NGS）分析，具有24个染色体拷贝数，目的是仅转移整倍体胚胎。在第5-7天到达胚泡阶段的胚胎上进行活检，方法是借助非接触式二极管激光（OctaxTM，MTG，德国）切割一小块滋养外胚层（5-10个细胞）。将活检的片段浸入0.2 mL PCR管，总体积为2.5 uL Tris-EDTA Buffer pH 8.0，(ThermoFisher Scientific Baltics, Vilnius, Lithuania)在-20摄氏度下冷冻，然后运至染色体实验室（巴西圣保罗）进行分析。使用Ion Reproseq试剂盒对样品进行细胞裂解，全基因组扩增（WGA）和文库构建（ThermoFisher Scientific, Germany).按照制造商的规程，使用StepOne（ThermoFisher Scientific，Germany）估算DNA量，并使用Ion Torrent PGMTM平台进行NGS检测。(ThermoFisher Scientific, Germany). 使用低覆盖全基因组工作流程，以中等灵敏度校准的Ion Reporter软件5.2版进行整倍性数据分析。定量测量拷贝数，并根据PGDIS报告胚胎结果的标准对胚胎进行分类。异常细胞<20％的胚胎被分类为整倍体，而异常细胞> 80％的胚胎被视为非整倍体。镶嵌胚胎是具有异常细胞的那些，范围从20％到80％。计算器的统计分析模型「感兴趣可看，正常阅读请略过，说白了就是告诉你咋算出来的」使用了自适应LASSO方式(Least Absolute Shrinkage and Selection Operator) 选择预测变量后，我们利用逻辑回归拟合最终模型。每个成熟卵母细胞的二元反应是整倍性（是/否）。为了评估预测因子对关键中间胚胎阶段的影响，我们进行了独立的逻辑回归分析，并采用二进制响应“每个成熟卵母细胞的2PN合子（是/否）”，“每个2PN合子的胚泡（是/否）”和“每个活检胚泡的整倍体胚泡（是/否）。”做出以下假设：（i）胚胎在统计学上与倍性状态无关，并且（ii）成熟卵母细胞达到胚泡期的概率在女性中是恒定的，仅取决于可能影响的解释变量（预测因子）响应。基于这些假设，逻辑模型产生概率“ p”作为输出，其中“ p”是给定相关预测因子，任何成熟的卵母细胞会变成整倍体胚泡的概率。使用保持方法在内部验证了最终模型。数据集被随机分为两个数据集，即训练和验证数据集。训练数据集的大小占总数的80％，用于拟合的计算；验证数据集占总数的20％。通过ROC曲线的曲线下面积（AUC）评估拟合的质量。将预测因子对胚泡整倍性概率的影响大小计算为胚泡整倍性减少的百分比。成熟的卵母细胞变成整倍体胚泡的概率p，用于计算获得≥1个整倍体胚泡所需的最少成熟卵母细胞数（n），使用公式卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图4) 卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图5) 成功的概率用π表示。它的补码1-π是有风险的，即尽管存在整倍体胚泡的可能性达到估计的成熟卵母细胞数量。“ p”的95％置信区间是从逻辑回归中获得的。在“ n”的公式中引入了这些限制，以生成所需数量的成熟卵母细胞的置信区间的相应限制。数学运算是有效的，因为估计量基于最大似然，并且函数是单调的。最后，创建了一个在线计算器，称为“ ART计算器”，使用上述公式和数学方程式自动进行两种类型的预测。第一种基于预处理预测因子，以估计在经历IVF / ICSI的不育夫妇中达到≥1个整倍体转移胚泡，所需成熟卵母细胞的最小数量。第二种利用预处理信息和收集或积累的成熟卵母细胞的实际数量，当在一个或多个卵母细胞回收周期后获得的卵母细胞数量少于预期数量时，提供获得上述结果的概率的修正估计值。ART计算器是使用超文本预处理器（PHP）语言编程的。研究最后的结果是女性平均年龄为38.9岁（95％置信区间[CI]：32.4–42.4岁）每位患者平均获得的成熟卵母细胞数量为6.3（95％CI：1.0–12.0）。每位患者可用于TE活检和NGS分析的囊胚平均数量为2.1（95％CI：0.0-5.0）。总共注射了2,520个成熟卵母细胞，882个胚胎进行了PGT-A。总体而言，队列研究中NGS后整倍体整倍体胚胎的百分比为34.8％。每位患者的整倍体囊胚平均数量为0.74（95％CI：0.0–2.0）。发现每个妇女的整倍体胚泡数目分布是负二项式「是或否，没有第三种答案」。

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图6) 卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图7)

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图8)

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图9)

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表1 |卵胞浆内单精子注射（ICSI）和植入前非整倍体基因检测（PGT-A）滋养体活检的347对夫妇的特点及其治疗。模型的研发女性年龄、ICSI的精子来源、非梗阻性无精子症患者（NOA）提取的睾丸精子和成熟卵母细胞数量作为预测因子除这些变量外，反应变量与所有其他预处理和治疗特征之间没有发现显著相关性在很大程度上，女性年龄是预测每个成熟卵母细胞囊胚成为整倍体的可能性的最相关因素成熟卵母细胞转变为整倍体囊胚的估计预测概率随着女性年龄的变化而逐渐降低，并且通过使用来自不同年龄段的无精子症男性的睾丸精子，总体上受到负向调节。女性年龄对每枚MII卵母细胞成为整倍体囊胚的概率显著降低（p<0.001）。使用射精精子和睾丸精子，每枚MII卵母细胞囊胚整倍性的年降低率分别为14.4%和12.1%。随着女性年龄的增加，每年的损失都在进行，但是精子来源对每年的减少没有显著影响不同情况的辅助生殖结果

随着年龄的增长，成年卵母细胞转化为整倍体胚泡的估计概率随着女性年龄的增长而逐渐降低，而使用NOA的男性的睾丸精子则总体上对这一概率产生了负面的调节

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图12) 每个成熟（MII）卵母细胞的胚泡整倍性概率。该图显示了MII卵母细胞转变为整倍体胚泡的可能性与女性年龄的关系。根据用于IVF / ICSI的精子来源，即从无阻塞性无精子症患者中提取的射精精子（蓝色）和睾丸精子，给出了估计的概率（实线）及其95％置信区间（虚线）。 NOA）（红色）。这种关系是非线性的范例1：预测实现≥1个整倍体囊胚转移所需的成熟卵母细胞个体化数量的示例

例如，对于用户设定的成功概率的80％，即整倍体囊胚为零的风险为20％，接受IVF / ICSI治疗的37岁患者，如将使用其伴侣的射精的精子，则需要11个成熟卵母细胞（置信区间：9–13个）才能获得至少一个整倍体胚泡进行转移（截图）。

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图13)

相比之下，如果同一名患者利用NOA（非梗阻无精症）伴侣的睾丸精子进行ICSI，则假定成功的可能性相同，最少成熟卵母细胞数将为14（置信区间：11-17）。

如果这个假设的患者只取了七个成熟的卵母细胞，那么关于自己射精和睾丸取精，分别至少有一个整倍体胚泡的可能性的修订估算值分别为64和55％

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图14) 范例2：

对于用户设定的成功概率的90％，即整倍体囊胚为零的风险为10％，一名30岁的患者至少需要4个个成熟卵母细胞通过使用射精的ICSI精子获得至少一个胚泡进行转移。如果使用睾丸精子，则预计成熟卵母细胞的数量将为7个。在这种情况下，预测表明成功实现至少一个整倍体胚泡的可能性为90％。像以前的情况一样，可以获得至少一个整倍体胚泡的修正概率。如果她随后收集了3个成熟的卵母细胞，则有关射精和睾丸精子至少有一个整倍体胚泡的可能性的修订估算值将分别为78和55％。

卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图15) 预测模型输出（精子射精）。该图显示了根据成熟卵母细胞的数量，具有≥1个整倍体胚泡卵母细胞的预测概率。每个实线代表一个女性年龄类别。虚线参考线表示达到所需结果的70％，80％和90％。卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图16)

参考文献

A Novel Predictive Model to Estimate the Number of Mature Oocytes Required for Obtaining at Least One Euploid Blastocyst for Transfer in Couples Undergoing in vitro Fertilization/Intracytoplasmic Sperm Injection: The ART Calculatorwww.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC/ 卵巢早衰选择三代试管成功率怎么算(图17)